Xã Định Thủy nằm ở phía Nam của huyện Mỏ Cày Nam, tỉnh Bến Tre. Diện tích xã là 12,1 km², với khí hậu nhiệt đới, gió mùa và mưa nhiều vào mùa hè. Dân số hiện tại của xã khoảng 9.000 người, chủ yếu là người dân tộc Kinh.
Xã Định Thủy có nhiều danh lam thắng cảnh đẹp như bến phà Định Thủy, rừng dừa Định Thủy, lò sấy khô cá tra Mỹ Long, khu du lịch sinh thái Định Thủy, và khu du lịch sinh thái Bờ Kè.
Đặc sản của xã Định Thủy có thể kể đến như mắm tép Định Thủy, cá kho tộ Định Thủy, và rượu dừa Định Thủy.